蜡梅花香基因SAMT的cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 彭忱晨 李慧芬 陈子柱 马蕾 龙章富
• 来源期刊: 农业科学与技术：英文版
• 学科: 农学
• 关键词: 蜡梅 花香基因 cDNA 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 页码范围: 82-87
• 分类号: S
• 字数: 1988字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4229-B.2012.01.023

摘要

[目的]研究蜡梅香基因SAMT的cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达。【方法]以蜡梅花瓣总RNA为模板进行RT—PCR，扩增得到与预期大小相f司的PCR产物带，回收RT—PCR产物，将其与PMD18．T载体进行T—A克隆连接并导入大肠杆菌DH5，经菌落PCR和双酶切鉴定，筛选带有目的基因的重组质粒并进行测序。[结果]测序证实成功克隆得到蜡梅花香基因SAMTcDNA的ORF片段，其长度为1196bp，编码380个氨基酸残基，与已报导的蜡梅SAMT（ABU88887）的同源性为99．2％将SAMT基因亚克隆到原核表达载体PGEX4T—i中，转化大肠杆菌DH5d获得其原核表达菌株pGSAMT；采用O．01mol／L的IPTG进行诱导表达，经SDS—PAGE分析，SAMT的融合表达蛋白分子量约为66kDa，与预期的26KDa的GST带和42-3KDa的蜡梅SAMT基因编码蛋白构成的融合蛋白大小接近。[结论]该研究成功克隆并表达了蜡梅花香基因SAMT。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龙章富	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学学院	2	6	2.0	2.0
2	马蕾	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0
3	李慧芬	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0
4	彭忱晨	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0
5	陈子柱	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0