下调TPH2重组慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘成 戴少军 李荣春 杨少兵 项红兵
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 色氨酸羟化酶 小干涉RNA 慢病毒 遗传载体
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 129-131
• 分类号: R34
• 字数: 2762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2012.01.047

摘要

目的 构建色氨酸羟化酶(TPH)-2基因小干涉RNA的重组慢病毒载体.方法 在TPH-2 mRNA序列中选择1个特异性靶序列,体外合成对应发卡样DNA片段,经退火后,将其定向克隆入siRNA载体,获得重组质粒pU6 -MCS-CMV-TPH2-shRNA,后者与慢病毒试剂共转染293细胞,同源重组产生Lentivirus-TPH2-siRNA.经聚合酶链反应(PCR)鉴定目的基因的表达并测定病毒滴度.结果 PCR表明Lentivirus-TPH2-siRNA构建正确,病毒滴度为3×108 TU/rnl.结论 获得的Lentivirus-TPH2-siRNA可以用于转基因瘙痒治疗的实验研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	项红兵	华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科	43	131	6.0	8.0
2	李荣春	武汉市普爱医院疼痛科	18	70	5.0	8.0
3	刘成	华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科	17	150	5.0	12.0
4	杨少兵	华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科	13	30	3.0	5.0
5	戴少军	武汉市商业职工医院麻醉科	4	12	2.0	3.0