单管多重PCR结合RDB技术在α-地贫产前诊断中的应用

• 作者: 周玉球 张永良 肖奇志 谢建红 郑勤
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 地中海贫血 酶联免疫吸附测定 产前诊断 反向点杂交
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 271-273
• 分类号: R556.9
• 字数: 4031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2012.03.008

摘要

目的 基因诊断结果在α-地贫的产前诊断中具有决定意义.采取两种不同技术原理的方法验证产前诊断结果,是保证产前诊断结果可靠性的基本要求.本文探讨检测常见非缺失型α-地贫的RDB技术作为单管多重PCR技术产前诊断α-地贫验证方法的可行性.方法 采用双盲法,对73例α-地贫产前诊断的标本分别采用针对中国人3种常见缺失型α-地贫突变的单管多重gap-PCR技术和针对常见3种非缺失α-地贫点突变的RDB法进行分析,根据单管多重PCR技术扩增产物电泳图谱和RDB膜条上显色的斑点分别判断某一个标本缺失型和非缺失α-地贫的突变类型,且与引产或出生后胎儿脐带血中Hb Bart′s定量结果进行比对.结果 单管多重PCR和RDB技术均能分别准确检出常见缺失型和非缺失型α-地贫各种突变类型.如将两者结合分析,还能提供相互佐证的重要信息:对于--SEA、-α3.7和-α4.2自身或相互组合的各种基因型标本,其RDB膜条的杂交斑点均不显色;而--SEA与αCSα、αQSα和αWSα组合的基因型标本该突变的正常对照点不显色.α-地贫产前诊断结果与胎儿脐带血电泳结果完全吻合.结论 单管多重PCR结合RDB技术同时应用于α-地贫的基因诊断,可保证产前诊断的可靠性,值得在临床遗传诊断实验室中推广应用.