志贺菌福氏5a M90T毒力蛋白Apyrase的表达、纯化及多克隆抗体制备

• 作者: 周围 呼和巴特尔 岳俊杰 廖翔 戴红梅 梁龙 王羽 高原
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 志贺菌福氏5a M90T Apyrase 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1080-1084
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2013.10.018

摘要

目的:克隆编码志贺菌福氏5a M90T毒力蛋白Apyrase的基因phoN2并实现表达,纯化后免疫BALB/c小鼠制备鼠抗Apyrase的多克隆抗体,并对多克隆抗体进行评价.方法:通过PCR扩增的志贺菌5a M90T中的基因phoN2克隆至表达载体pET24a中,将重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)中,筛选阳性克隆,进行IPTG诱导表达并纯化Apyrase-HIS融合蛋白.以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备该蛋白的多抗.Western blot、ELISA、免疫荧光鉴定获得的抗血清.结果:成功构建了原核表达载体pET24 a-Apyrase,经诱导表达出相对分子量为28 kD的融合蛋白,用纯化的融合蛋白作为抗原免疫小鼠制备的多克隆抗体,通过Western blot、ELISA、免疫荧光法证明多克隆抗体制备成功.结论:成功制备了志贺菌福氏5a特异性的鼠多克隆抗体,为进一步研究Apyrase蛋白在志贺菌福氏5a M90T中的表达、定位及志贺菌福氏5a M90T的快速检测奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳俊杰	军事医学科学研究院生物工程研究所	26	108	6.0	9.0
2	梁龙	军事医学科学研究院生物工程研究所	33	293	8.0	16.0
3	廖翔	军事医学科学研究院生物工程研究所	14	163	7.0	12.0
4	戴红梅	军事医学科学研究院生物工程研究所	19	88	6.0	8.0
5	王羽	内蒙古农业大学兽医学院	27	128	7.0	11.0
6	周围	军事医学科学研究院生物工程研究所	11	28	4.0	4.0
7	高原	军事医学科学研究院生物工程研究所	5	13	2.0	3.0