shRNA靶向干扰COX-2稳定细胞系的建立及鉴定

• 作者: 汪先桃 涂植光 熊海玉 董晋豫 郭变琴 马婷婷
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: COX-2 shRNA 稳定细胞系 肝癌
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 774-779
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2013.06.0031

摘要

脂质体法将COX-2-shRNA载体转染肝癌细胞株SMMC-7721,G418筛选获得稳定细胞系COX-2-shRNA-SMMC-7721,通过RT-PCR和Western blot分别检测细胞系中COX-2基因mRNA转录水平和蛋白质表达水平,通过MTT、流式细胞术和Transwell等观察细胞恶性生物学行为的改变.建立COX-2-shRNA-SMMC-7721(干扰组)、HK-SMMC-7721(阴性对照组)细胞株.干扰组的COX-2基因mRNA的转录水平、蛋白表达水平和细胞增殖能力较阴性对照组和SMMC-7721(空白组)明显下降(P＜0.05),而阴性对照组与空白组间无明显差异(P＞0.05)；干扰组、阴性对照组和空白组处于G0/G1期的细胞分别为(68.85±0.27)％、(53.05±0.35)％和(53.54±0.33)％；细胞凋亡率分别为(9.60±0.20)％、(1.79±0.23)％和(1.75±0.20)％；穿膜细胞数分别为(117.60±5.30)、(338.40±11.50)和(347.40±12.80)个.干扰组与阴性对照组和空白组有显著差异(P＜0.05),而阴性对照组与空白组间无明显差异(P＞0.05).利用RNA干扰技术成功构建了靶向干扰COX-2的稳定肝癌细胞系COX-2-shRNA-SMMC-7721,为COX-2分子的作用机制研究提供了细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪先桃		7	36	4.0	6.0
2	涂植光		172	1533	19.0	32.0
3	熊海玉		4	0	0.0	0.0
4	马婷婷		4	0	0.0	0.0
5	董晋豫		2	0	0.0	0.0
6	郭变琴		4	20	3.0	4.0