黑曲霉分泌表达载体的构建以及绿色荧光蛋白的表达

• 作者: 余希尧 唐丽云 郑红玉 钟泽民 项林盛 黄毓茂
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: EGFP基因 黑曲霉 表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学与兽医学
• 页码范围: 574-579
• 页数: 6页
• 分类号: S855
• 字数: 3389字
• 语种: 中文

摘要

采用PCR扩增得到糖化酶基因启动子（PglaA-g）、色氨酸合成酶基因终止子（TtrpC）和潮霉素抗性筛选标记基因，依次连接这些基因元件，获得黑曲霉Aspergillus niger分泌表达载体pPHT．EGFP基因与黑曲霉表达载体pPHT连接，得到重组表达载体pPHT-EGFP．pPHT-EGFP表达载体通过原生质体转化法转化黑曲霉，经潮霉素抗性筛选、基因组PCR鉴定阳性重组转化子．荧光显微镜观察表明，绿色荧光蛋白成功表达，而且荧光的分布具有一定的规律，主要集中在菌丝顶端、膈膜以及培养基中；固体培养基发出绿色荧光，表明绿色荧光蛋白分泌到培养基中，属于分泌性表达，蛋白分泌的部位主要位于菌丝顶端．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄毓茂	华南农业大学兽医学院	72	520	12.0	20.0
2	唐丽云	华南农业大学兽医学院	7	33	2.0	5.0
3	钟泽民	华南农业大学兽医学院	6	44	3.0	6.0
4	余希尧	华南农业大学兽医学院	6	44	3.0	6.0
5	项林盛	华南农业大学兽医学院	6	33	2.0	5.0
6	郑红玉	华南农业大学兽医学院	5	3	1.0	1.0