大鼠Mettl9基因的克隆及其慢病毒表达载体的构建

• 作者: 刘发益 彭志宏 舒坤贤 邬力祥 韩仰 黄柏胜
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲基转移酶样基因9 慢病毒表达载体 p53基因
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 64-68,78
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3597字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2013.01.010

摘要

目的:克隆大鼠Mettl9基因,并构建慢病毒表达载体,为研究Mettl9基因功能奠定基础.方法:提取原代培养大鼠星形胶质细胞的总RNA,应用RT-PCR方法,扩增出Mettl9 基因的cDNA,克隆至pGEM-T载体上并测序;再将该基因亚克隆至慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES-EGFP,测序鉴定,利用脂质体lipofectamine 2000转染至293T细胞进行包装,感染U251细胞,荧光显微镜下观察其表达.结果:Mettl9 cDNA的RT-PCR扩增产物为954 bp的基因片段,连接到pGEM-T载体后测序结果向GenBank递交获得收录号HQ898855;构建的pLenti6.3-Mettl9-IRES-EGFP慢病毒载体在293T细胞完成包装,测得慢病毒滴度达1.825×108 TU/mL;经感染U251细胞,荧光显微镜下可见绿色荧光.结论:成功克隆了SD大鼠Mettl9基因,构建了该基因的慢病毒表达载体pLenti6.3-Mettl9-IRES-EGFP.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	舒坤贤	重庆邮电大学生物信息学研究所	64	491	10.0	21.0
2	邬力祥	中南大学湘雅医学院生理学系	76	332	11.0	15.0
3	刘发益	中南大学湘雅医学院生理学系	33	193	8.0	12.0
4	彭志宏	中南大学湘雅医学院生理学系	109	1040	18.0	25.0
5	黄柏胜	中南大学湘雅医学院生理学系	24	55	4.0	6.0
6	韩仰	中南大学湘雅医学院生理学系	12	27	3.0	5.0