番茄黄化曲叶病毒V2基因原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 周晓伟 周益军 季英华 程兆榜 蔡振东
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄黄化曲叶病毒 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 143-148
• 页数: 6页
• 分类号: S436.412|S432.41
• 字数: 3295字
• 语种: 中文

摘要

通过PCR的方法,从番茄黄化曲叶病毒江苏分离物DNA中扩增到V2基因,并克隆到pMD18-T载体,序列测定结果显示其与报道的XH2分离物序列完全一致,核苷酸序列全长351 bp,编码115个氨基酸,推测分子量约13 kD.将该V2基因亚克隆到原核表达载体PET32a中获得重组表达载体PET32a-V2,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG可诱导1个分子量约为32 kDa的融合蛋白(含His标签)表达,经Ni+ NTA亲和柱纯化,获得纯化的重组蛋白,免疫家兔制备TYLCV-V2蛋白的多克隆抗体Anti-V2,间接ELISA测定Anti-V2的效价达1∶655 360,Western blot及DIBA分析结果表明Anti-V2可与V2蛋白发生特异血清反应,可为进一步研究V2蛋白的功能提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程兆榜	江苏省农业科学院植物保护研究所	76	1073	20.0	29.0
2	周益军	江苏省农业科学院植物保护研究所	119	1884	25.0	37.0
3	季英华	江苏省农业科学院植物保护研究所	20	378	10.0	19.0
4	周晓伟	江苏省农业科学院植物保护研究所	2	5	2.0	2.0
8	蔡振东	江苏省农业科学院植物保护研究所	1	2	1.0	1.0