鸡pcdh8基因部分片段的克隆、表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 李永海 李萌 林俊堂 赵兴华
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 原钙黏蛋白 异源表达 鸡胚
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 20-23,192
• 页数: 5页
• 分类号: S831
• 语种: 中文

摘要

为了制作鸡原钙黏蛋白8(protocadherin 8,pcdh 8)的多克隆抗体,试验设计了针对pcdh 8膜外肽段相应基因的1对引物,从鸡胚的脑组织中提取总RNA,通过RT-PCR合成cDNA;然后以cD-NA为模板扩增膜内肽段对应的基因片段,测序正确后将其克隆至原核表达载体pGEX-2TK中;在大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导表达GST-pcdb 802融合蛋白;利用Glutathione-sepharose 4B柱亲和层析纯化GST-pcdh 802融合蛋白,并采用足垫免疫的方法免疫大鼠制作多克隆抗体.结果表明:成功纯化了pcdh 8的融合蛋白,并制备出多克隆抗体,经Western-blot检测该抗体可用于鸡胚脑组织pcdh 8蛋白的表达检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林俊堂		61	101	5.0	6.0
2	李永海		11	29	3.0	4.0
3	李萌		12	30	3.0	4.0
4	赵兴华		3	4	1.0	2.0