干涉UBXN1慢病毒颗粒制备及稳定细胞系的建立

• 作者: 巩伟丽 张飒 李腾 涂海清 韩秋影
• 来源期刊: 科学技术与工程
• 学科: 生物学
• 关键词: UBXN1 慢病毒 稳定干涉
• 年，卷（期）: 2013,（22）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 6389-6393
• 页数: 5页
• 分类号: Q253
• 字数: 3377字
• 语种: 中文

摘要

构建并鉴定UBXN1-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术以及慢病毒感染系统建立稳定干涉细胞系并进一步研究UBXN1的功能.将携带不同特异性干涉序列的DNA片段插入PLKO.1载体中构建慢病毒表达载体,并制备慢病毒颗粒.将慢病毒颗粒感染U2OS细胞,建立稳定干涉细胞系,应用real-time PCR和western blot技术分别检测U2OS细胞中UBXN1 mRNA和蛋白质水平的表达差异.重组克隆经酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,western blot检测证实设计的五条shRNA干扰序列有效的敲低U2OS细胞中内源性UBXN1的表达.成功制备UBXN1的慢病毒干涉颗粒,并建立UBXN1稳定下调的U2OS细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	巩伟丽		22	150	6.0	12.0
2	张飒		13	87	6.0	9.0
3	韩秋影		8	11	2.0	3.0
4	李腾		6	9	1.0	3.0
5	涂海清		1	0	0.0	0.0