双碳源流加对重组毕赤酵母高效表达葡萄糖氧化酶的影响

• 作者: 堵国成 张娟 沈伊娜 陈坚 顾磊
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 重组毕赤酵母 葡萄糖氧化酶 双碳源 醇氧化酶(AOX)
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 工业生物技术
• 页码范围: 927-936
• 语种: 中文

摘要

葡萄糖氧化酶(GOD)是一种具有广泛应用前景的工业酶.为了实现葡萄糖氧化酶的高效生产,提高重组毕赤酵母生产GOD的产量和增强生产强度,对重组毕赤酵母诱导阶段的初始菌体浓度和甲醇浓度进行了优化.在此基础上,诱导期采用了双碳源(甘油、山梨醇和甘露醇)与甲醇混合流加的模式.研究发现,最佳诱导前初始菌体浓度和甲醇浓度分别为100 g/L和18 g/L,此时GOD产量为427.6 U/mL.在诱导阶段采用甘油、山梨醇和甘露醇与甲醇的混合添加均可以提高GOD产量,其中甘露醇与甲醇的混合流加效果最为显著.当甲醇与甘露醇混合流加的比例为20∶1(W/W)时,诱导156h GOD产量和生产强度分别可达711.3 U/mL和4.60 U/(mL·h),比甲醇单一流加策略结果分别提高了66.3％和67.9％.此外采用合适的甘露醇混合流加策略不但不会抑制AOX1启动子的表达,甚至有一定促进作用,AOX酶活性为8.8 U/g(对照为5.2 U/g).双碳源流加方式还能推广到毕赤酵母其他表型中,为该系统高效表达外源蛋白提供一种新策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张娟	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	44	211	7.0	13.0
5	陈坚	江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室	447	6664	38.0	58.0
9	堵国成	江南大学工业生物技术教育部	339	3648	30.0	42.0
10	顾磊	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	5	16	3.0	4.0
14	沈伊娜	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	7	1.0	1.0