蜱传森林脑炎病毒非结构蛋白1原核表达载体的构建

• 作者: 史红艳 孙延波 宋天一 张哲 李菁华
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蜱传森林脑炎病毒 非结构蛋白1 原核表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 方法学
• 页码范围: 620-624
• 页数: 5页
• 分类号: R373.31
• 字数: 3376字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7694/jldxyxb20130341

摘要

目的:构建蜱传森林脑炎病毒(TBEV)非结构蛋白1(NS1)的原核表达载体,以期获得其高纯度的表达,为制备多克隆抗体及其功能的研究奠定实验基础.方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因重组技术构建原核表达载体pEASYTM-E1-NS1.将重组后质粒pEASYTM-E1-NS1转化至BL21细胞,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后进行镍离子亲和纯化,利用Bradford法测定蛋白浓度.采用SDS-PAGE和Westernblotting法分析融合蛋白的表达水平.结果:含TBEV NS1的原核表达载体pEASYTM-E1-NS1经诱导后,可获得以包涵体形式存在的融合蛋白,通过亲和纯化得到较高纯度的蛋白质.SDS-PAGE和Western blotting,在相对分子质量约40 000处有特异性蛋白条带.结论:成功构建重组pEASYTM-E1-NS1原核表达载体,获得高纯度的重组TBEV NS1的融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙延波	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	55	163	7.0	8.0
2	李菁华	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	32	168	7.0	11.0
3	史红艳	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	35	116	5.0	9.0
4	张哲	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	38	100	6.0	8.0
5	宋天一	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	2	4	1.0	2.0