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摘要:
目的:构建蜱传森林脑炎病毒(TBEV)非结构蛋白1(NS1)的原核表达载体,以期获得其高纯度的表达,为制备多克隆抗体及其功能的研究奠定实验基础.方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因重组技术构建原核表达载体pEASYTM-E1-NS1.将重组后质粒pEASYTM-E1-NS1转化至BL21细胞,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后进行镍离子亲和纯化,利用Bradford法测定蛋白浓度.采用SDS-PAGE和Westernblotting法分析融合蛋白的表达水平.结果:含TBEV NS1的原核表达载体pEASYTM-E1-NS1经诱导后,可获得以包涵体形式存在的融合蛋白,通过亲和纯化得到较高纯度的蛋白质.SDS-PAGE和Western blotting,在相对分子质量约40 000处有特异性蛋白条带.结论:成功构建重组pEASYTM-E1-NS1原核表达载体,获得高纯度的重组TBEV NS1的融合蛋白.
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篇名 蜱传森林脑炎病毒非结构蛋白1原核表达载体的构建
来源期刊 吉林大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 蜱传森林脑炎病毒 非结构蛋白1 原核表达 融合蛋白
年,卷(期) 2013,(3) 所属期刊栏目 方法学
研究方向 页码范围 620-624
页数 5页 分类号 R373.31
字数 3376字 语种 中文
DOI 10.7694/jldxyxb20130341
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 孙延波 吉林大学白求恩医学院病原生物学系 55 163 7.0 8.0
2 李菁华 吉林大学白求恩医学院病原生物学系 32 168 7.0 11.0
3 史红艳 吉林大学白求恩医学院病原生物学系 35 116 5.0 9.0
4 张哲 吉林大学白求恩医学院病原生物学系 38 100 6.0 8.0
5 宋天一 吉林大学白求恩医学院病原生物学系 2 4 1.0 2.0
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蜱传森林脑炎病毒
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融合蛋白
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双月刊
1671-587X
22-1342/R
大16开
吉林省长春市新民大街828号
12-23
1959
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