FimH重组蛋白的原核表达及纯化

• 作者: 刘忠芳 孟柳燕 李宇红 李晓霞 殷晓佳 陈林
• 来源期刊: 口腔医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: FimH 大肠杆菌 沙门氏菌 重组蛋白 表达和纯化
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 893-896
• 页数: 4页
• 分类号: R781.2
• 语种: 中文

摘要

目的:在大肠杆菌中构建并表达3种FimH重组蛋白,并对FimH重组蛋白的培养条件进行优化,制备高纯度FimH重组蛋白.方法:采用原核表达载体pET28a构建出能表达FimH的重组质粒,并分别对诱导温度、IPTG浓度、诱导时间等条件进行优化,以提高重组蛋白的产量和增大其可溶性,最后以亲和层析分离纯化3种FimH重组蛋白.结果:成功构建出表达大肠杆菌(K12,BL21)和沙门氏菌(S.T.)FimH的原核表达载体pET28a-K12/BL21/S.T.,经酶切、测序和Western Blot鉴定,目的蛋白表达正确.在适当浓度的IPTG诱导,15℃震荡培养20 h,可使FimH的表达量达到最大,分离纯化的蛋白在SDS-PAGE中显示为一条带.结论:本研究构建以3种FimH为表面呈现系统的表达载体,3种FimH基因和预测蛋白结构略有差异.本研究为后续研究3种蛋白 生物活性差异及其靶向M细胞的免疫佐剂活性提供物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宇红		27	135	6.0	10.0
2	李晓霞		7	71	3.0	7.0
3	陈林		14	98	6.0	9.0
4	刘忠芳		2	0	0.0	0.0
5	殷晓佳		1	0	0.0	0.0
6	孟柳燕		9	11	2.0	3.0