靶向LOX-1基因RNAi慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 李俊 陶贵周 黄建华
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: LOX-1 慢病毒载体 RNA干扰 人脐静脉内皮细胞 凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 973-978
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2013.07.0062

摘要

该研究针对LOX-1基因(OLR1)设计并合成3条siRNA干扰序列,与双酶切的U6-vshRNA-CMV-GFP慢病毒载体连接得到重组载体,包装慢病毒并测定滴度.采用最佳MOI值及转染条件,转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),转染96 h后通过RT-PCR和Western blot检测LOX-1 mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测转染后ox-LDL诱导HUVEC的凋亡情况.测序证实靶向LOX-1 RNAi慢病毒载体构建成功；RT-PCR和Western blot结果显示转染后LOX-1 mRNA及蛋白均受到不同程度抑制(P＜0.05)；流式检测结果显示抑制LOX-1表达后ox-LDL诱导HUVEC凋亡显著减少(P＜0.05).该研究应用RNAi技术成功构建LOX-1 RNAi慢病毒载体,有效抑制了LOX-1的表达,显著减少了ox-LDL诱导的凋亡,为进一步研究LOX-1基因沉默减轻内皮细胞损伤及相应保护机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶贵周		102	386	11.0	15.0
2	李俊		3	2	1.0	1.0
3	黄建华		6	3	1.0	1.0