灰葡萄孢菌AUR1基因真核表达载体的构建、表达及酶活性分析

• 作者: 刘小平 苟萍 邱永春
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: pYES2穿梭载体 灰葡萄孢菌 肌糖磷脂酰神经酰胺合成酶 短梗霉素A 酶活力
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 78-86
• 语种: 中文

摘要

为了研究灰葡萄孢菌肌糖磷脂酰神经酰胺合成酶(BcAUR1基因)的表达及酶活性,采用RT-PCR方法,利用含有FLAG标签以及BamH Ⅰ、Xho Ⅰ酶切位点的AUR1特异引物从灰葡萄孢菌中扩增得到BcAUR1基因.将BcA UR1基因与穿梭质粒pYES2重组,得到pYES2-BcAUR1质粒采用醋酸锂转化法导入酿酒酵母尿嘧啶突变菌株△yor1中,Western blotting检测肌糖磷脂酰神经酰胺(IPC)合成酶表达,HPLC检测IPC合成酶活力.结果显示pYE S2-BcA UR1在酿酒酵母尿嘧啶突变菌株△yorl中获得表达,pYES2-BcA UR1转化子IPC合成酶活性显著增高,比空载转化子约提高1倍.低浓度的AbA能够抑制空载pYES2酵母转化子生长,但pYES2-BcA UR1酵母转化子能抵抗AbA对菌体生长的抑制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苟萍	新疆大学生命科学与技术学院	47	417	11.0	19.0
2	刘小平	新疆大学生命科学与技术学院	4	4	1.0	2.0
3	邱永春	新疆大学生命科学与技术学院	1	1	1.0	1.0