棉花GhGGPase基因克隆、序列分析及原核表达

• 作者: 李榕 李鸿彬 禄亚洲 赛富涛
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花纤维 GDP-L-半乳糖磷酸化酶基因克隆 组织表达特异性 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 页码范围: 1008-1015
• 页数: 8页
• 分类号: S562|S503.52
• 字数: 4247字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2013.06.005

摘要

[目的]棉花GDP-L-半乳糖磷酸化酶(GhGGPase)基因的克隆、功能序列分析及原核表达.[方法]利用RT-PCR技术从棉花纤维中克隆棉花GhGGPase基因,进行生物信息学分析,构建原核表达载体pET28a-GhGGPase,转化大肠杆菌BL21 (DE3)并进行体外诱导表达,通过SDS-PAGE检测目的蛋白的表达.[结果]从陆地棉纤维组织中扩增得到L-半乳糖磷酸化酶基因的cDNA开放读码框为1350 bp,为包含450个氨基酸的蛋白质,理论分子质量为49 kDa.对氨基酸序列进行生物信息学分析,GhGGPase蛋白具有组氨酸三聚体(HIT)蛋白超家族的主要特性的结构域.进化树分析的表明棉花GhGGPase与柑橘CuGGPase在进化上亲缘关系上较近.成功构建了pET28a-GhGGPase原核表达载体；获得分子质量约为49kDa左右的重组蛋白GhGGPase.半定量RT-PCR的组织表达特异性分析表明GhGGPase基因与棉纤维的快速伸长发育密切相关.[结论]GhGGPase基因的克隆、序列分析和重组蛋白的诱导表达为深入研究该基因在棉纤维发育中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李榕	石河子大学生命科学学院	9	14	3.0	3.0
2	禄亚洲	石河子大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
3	赛富涛	石河子大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0