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抗人CD86单链抗体的基因克隆、表达及结合活性分析
抗人CD86单链抗体的基因克隆、表达及结合活性分析
作者:
夏永洁
孔永
安萌
朱华亭
沈立军
王婧
王志强
邱玉华
韩莲花
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
CD86
单链抗体
真核表达
摘要:
目的 构建并在CHO细胞中表达抗人CD86单链抗体(CD86-scFv),研究该抗体与抗原的结合特性及介导的生物学功能.方法 从分泌鼠源CD86抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL基因,构建含有前导肽L-VH-Linker-VL抗体编码基因的表达载体并转染CHO细胞.经筛选高分泌株并扩大培养后收集上清进行纯化.流式细胞术分析CD86-scFv对不同细胞膜型CD86分子的识别及与鼠源亲本抗体1D1的竞争抑制效应.MTT法分析CD86-scFv与Raji细胞表达的CD86结合后对细胞生长的影响.结果 获得了稳定表达抗人CD86-scFv的CHO细胞株及相应抗体.CD86-scFv与CD86基因转染细胞株L929-CD86、天然表达CD86分子的人B系淋巴瘤细胞Raji和Daudi细胞的阳性结合率分别为67.0%、72.3%和80.5%.CD86-scFv对鼠源亲本抗体1D1具有竞争结合能力,将CD86-scFv(终浓度20μg/mL)加入Raji细胞共同培养72 h时的细胞生长抑制率为28.3%.结论 成功构建了稳定分泌抗人CD86-scFv的CHO细胞株(命名为SA-IV).该抗体能够识别CD86分子并具有良好的生物学活性.
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文献信息
篇名
抗人CD86单链抗体的基因克隆、表达及结合活性分析
来源期刊
细胞与分子免疫学杂志
学科
医学
关键词
CD86
单链抗体
真核表达
年,卷(期)
2013,(2)
所属期刊栏目
抗体工程
研究方向
页码范围
178-181
页数
分类号
R392.11
字数
语种
中文
DOI
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研究主题发展历程
节点文献
CD86
单链抗体
真核表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
细胞与分子免疫学杂志
主办单位:
陕西省免疫学会
中国免疫学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1007-8738
CN:
61-1304/R
开本:
大16开
出版地:
西安市长乐西路169号
邮发代号:
52-184
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
7013
总下载数(次)
22
总被引数(次)
39763
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