人pcsk9基因原核表达载体的构建及诱导表达

• 作者: 俞辉 刘忠民 宋金龙 李风梅
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: 人前蛋白转化酶枯草溶菌素9 表达载体 诱导表达 优化条件
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1657-1660
• 页数: 4页
• 字数: 3743字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)的原核表达载体,优化pcsk9诱导表达条件.方法 聚合酶链式反应扩增人工合成的pcsk9 cDNA序列.扩增产物经双酶切、连接,构建pET-28b-pcsk9表达载体;将重组质粒转化入大肠杆菌表达菌BL21(DE3)的感受态细胞中,分别在不同条件下对其进行诱导,获得pET-28b-pcsk9的最佳诱导表达条件.结果 成功构建了pET-28b-pcsk9重组表达载体,其最佳表达条件为菌液光密度值取0.6,诱导温度取30℃,诱导剂终浓度取1.0 mmol/L,诱导时间取8 h.结论 该重组表达载体构建成功,在大肠杆菌表达菌BL21(DE3)中可有效地表达,对诱导所用的温度和时间相对比较敏感.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李风梅	广州医科大学第一附属医院检验科	3	10	2.0	3.0
2	俞辉	广州医科大学第一附属医院检验科	5	11	2.0	3.0
3	宋金龙	广州医科大学第一附属医院检验科	12	76	4.0	8.0
4	刘忠民	广州医科大学第一附属医院检验科	30	104	6.0	8.0