DCE-01菌株果胶酯酶基因克隆与表达

• 作者: 冯湘沅 刘正初 成莉凤 李琦 段盛文 程毅 郑科 郑霞
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 果胶酯酶 基因克隆 原核表达 水解圈
• 年，卷（期）: 2013,（15）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 162-165
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文

摘要

从麻类脱胶高效菌株DCE-01中克隆果胶酯酶基因并进行原核表达.根据全基因组测序注释结果设计引物,PCR扩增果胶酯酶基因连接到pEASY-E1载体上,导入大肠杆菌进行诱导表达,采用水解圈法进行选择和定量分析.结果表明:克隆出全长1107bp的果胶酯酶基因(GenBank登录号:KC422449),编码368个氨基酸；该基因表达蛋白质序列的前26个氨基酸为信号肽,前导蛋白的分子量约为39.6ku,成熟蛋白为36.9 ku,pI为9.1；基因工程菌株以高度酯化橘子果胶为底物的发酵液粗酶活为1.5IU/mL,是原始菌株DCE-01的22.4倍.本研究成功发掘出果胶酯酶基因,其表达产物果胶酯酶能降解高甲氧基果胶,在低甲氧基果胶制备方面具有重要应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李琦	湖南农业大学生物安全科学技术学院	12	76	5.0	8.0
2	刘正初	中国农业科学院麻类研究所	68	454	11.0	16.0
3	冯湘沅	中国农业科学院麻类研究所	44	278	9.0	14.0
4	郑科	中国农业科学院麻类研究所	50	301	9.0	14.0
5	段盛文	中国农业科学院麻类研究所	42	231	9.0	13.0
6	成莉凤	中国农业科学院麻类研究所	32	91	6.0	7.0
7	郑霞	中国农业科学院麻类研究所	19	61	5.0	6.0