利用慢病毒表达载体干扰梅花鹿角柄骨膜细胞P21基因

• 作者: 李春义 王大涛 秦欣 褚文辉 赵海平 郭倩倩 鲁晓萍
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鹿茸再生 P21 基因 RNAi 角柄骨膜 慢病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 页码范围: 116-121
• 页数: 6页
• 分类号: Q75|S825
• 字数: 4581字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2014.1719

摘要

利用慢病毒干扰系统，对东北梅花鹿角柄骨膜干细胞（PP细胞）P21基因进行干扰。结果表明：筛选出的2条针对梅花鹿P21基因的siRNA与载体质粒PLVTHM连接成功，并与pMD2．G、pCMV-dr8.9质粒共转染到293t细胞，获得重组慢病毒；通过感染PP细胞并利用流式细胞仪进行分选，获得了纯度90％以上的感染细胞；荧光定量RT-PCR检测表明P21基因的mRNA水平大幅度下调，干扰效率达到70％。表明成功干扰了P21基因在PP细胞中的表达，获得了低表达P21的PP细胞系。