实时荧光PCR熔解曲线法在β地中海贫血基因诊断和产前诊断中的临床应用评价

• 作者: 严提珍 唐宁 李伍高 王秋华 罗世强 聂昌君 蔡稔 钟青燕
• 来源期刊: 柳州医学
• 学科: 医学
• 关键词: Β-地中海贫血 实时荧光PCR 熔解曲线分析 基因诊断 产前诊断
• 年，卷（期）: lzyx_2014,（1）
• 页码范围: 10-15
• 页数: 6页
• 分类号: R556

摘要

目的对荧光PCR熔解曲线法用于β地中海贫血（β地贫）基因诊断和产前诊断进行临床评价。方法收集2011年1至8月柳州市妇幼保健院优生遗传实验室外周血标本451份，其中经血液学表型分析为β地贫阳性表型标本372份，β地贫阴性表型标本79份。同时收集2011年6—9月夫妇双方经PCR—RDB针法确诊为β地贫基因携带者，在我院行β地贫产前诊断的胎儿绒毛、羊水及脐带血标本共84份，其中孕10～β周胎儿绒毛标本16份、孕16—24周羊水标本64份、孕17周以上胎儿脐血标本4份。按双盲对照试验，分别采用荧光PCR熔解曲线法（可检测24种β珠蛋白基因突变）、PCR-反向点杂交（RDB探针法（可检测17种β-珠蛋白基因突变）和DNA测序法同时对451份外周血标本和84份胎儿绒毛、羊水、脐带血产前诊断标本进行检测。计算荧光PCR熔解曲线法和RDBPCR探针法、DNA基因测序法检测结果的野生型符合率、突变型符合率和总符合率。结果利用荧光熔解曲线法在451份外周血标本中共检出β种突变类型、19种基因型，其中有447份标本与PCR—RDB针法的基因型检测结果相符，符合率为99．1％（447／451），902个等位基因位点检出符合率为99．6％（898／902），有4份标本与PCR—RDB针法的基因型检测结果不相符，经DNA测序法验证，有3份标本与荧光熔解曲线法的检测结果完全一致，1份标本的β珠蛋白基因突变不在荧光熔解曲线法检测范围而未被检出。450份外周血标本的荧光熔解曲线法检测结果与DNA测序法相符，符合率为99．8％（450／451）。利用荧光熔解曲线法在84份产前诊断胎儿标本中共检出8种突变类型、18种基因型，168个等位基因位点的检测结果与PCR—RDB针法和DNA基因测序法检测结果符合率为100％。结论荧光PCR熔解曲线法可同时检测多份待测标本，并可准确检出多种基因突变类型，可用�

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐宁	广西柳州市妇幼保健院检验科	24	61	4.0	7.0
2	蔡稔	广西柳州市妇幼保健院检验科	27	133	5.0	11.0
3	严提珍	广西柳州市妇幼保健院检验科	9	28	1.0	5.0
4	罗世强	广西柳州市妇幼保健院检验科	10	36	3.0	6.0
5	李伍高	广西柳州市妇幼保健院检验科	5	34	2.0	5.0
6	钟青燕	广西柳州市妇幼保健院检验科	3	26	1.0	3.0
7	王秋华	广西柳州市妇幼保健院检验科	2	26	1.0	2.0
8	聂昌君	广西柳州市妇幼保健院检验科	1	0	0.0	0.0