棉花GhEPSPS基因的原核表达载体的构建及诱导表达

• 作者: 何林池 倪万潮 巩元勇 帕尔哈提·买买提 束红梅 郭书巧
• 来源期刊: 棉花学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 GhEPSPS基因 原核表达 SDS-PAGE
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 563-568
• 页数: 6页
• 分类号: S562.01
• 字数: 3984字
• 语种: 中文

摘要

目的在于构建棉花GhEPSPS基因的原核表达载体,并在宿主大肠杆菌中成功诱导表达.利用RT-PCR技术从陆地棉苏棉18中克隆获得GhEPSPS基因的开放阅读框序列,连接到pEASY-Blunt平端载体,构建获得重组载体pEASY-Blunt-GhEPSPS;以该重组载体为模板,PCR获得两端含有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的GhEPSPS基因CDS序列,通过这2个酶切位点插入到pET32a载体,构建获得原核表达重组载体pET32a-GhEPSPS,转化到宿主菌株BL21 (DE3)中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测目的基因的表达情况.研究结果表明,成功克隆获得了棉花GhEPSPS基因的CDS序列,并成功构建了该基因的原核表达载体,目的基因能够在宿主菌中被诱导大量表达.该研究结果将为深入研究棉花EPSPS酶的结构、功能以及酶学特性提供重要的研究基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	帕尔哈提·买买提		13	43	4.0	6.0