非洲猪瘟病毒P54蛋白的真核表达及间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 吕建强 唐勇 曹琛福 梁云浩 陶虹
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 P54蛋白 重组杆状病毒 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 373-378
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文

摘要

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达出非洲猪瘟病毒P54蛋白.经SDS-PAGE和Western-blot分析后,以P54重组蛋白作为检测抗原包被酶标板,通过优化各反应条件,建立了检测非洲猪瘟血清抗体的间接ELISA方法.结果显示,P54重组蛋白的大小约为25 ku;经Western-blot试验证实,它具有良好的抗原性.建立的间接ELISA方法的检测灵敏度可达1:320,批内、批间变异系数均小于10％.与商品化的非洲猪瘟竞争ELISA试剂盒比较,符合率达100％.用该间接ELISA方法检测其他不同疫病猪的阳性血清样本,结果均为阴性,表明无交叉反应.结果表明,建立的用以检测非洲猪瘟病毒的间接ELISA方法具有敏感性高、重复性好、特异性好的特点.