非洲猪瘟病毒P54基因原核表达载体的构建与表达

• 作者: 侯艳梅 李琳 栾慎顺 王建华 肖妍 董志珍 蔡国瑞 赵祥平 陈本龙
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 P54基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 316-320
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1|Q786
• 字数: 4264字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.04.007

摘要

根据GenBank中非洲猪瘟病毒(ASFV)P54基因序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法从ASFV DNA中分别扩增出了P54基因片段和经过改造的跨膜信号肽缺失的P54基因,将其克隆到表达载体pET28b中,构建了重组质粒pET-P54和pET-P54q,测序验证后转化入表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE,Western-blotting检测.结果显示,经过改造的信号肽缺失的重组菌pET-P54q可表达出分子质量约24.5 ku的重组融合蛋白,表达的蛋白以可溶形式存在于菌体中,经镍柱亲和层析纯化可获得纯度较高的目的蛋白.纯化的蛋白能与ASFV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,证实,表达的蛋白具有较好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡国瑞		11	92	5.0	9.0
2	李琳	天津大学农业与生物工程学院	46	275	8.0	14.0
3	王建华		15	35	3.0	5.0
4	侯艳梅		12	52	4.0	7.0
5	赵祥平		25	80	6.0	8.0
6	董志珍		23	81	6.0	8.0
7	栾慎顺		7	32	3.0	5.0
8	陈本龙		7	26	3.0	5.0
9	肖妍		14	39	4.0	6.0