C57小鼠 LATl 真核表达载体的构建及其对Neuro-2a 细胞的影响

• 作者: 刘田福 刘茂林 卫兵艳 樊林花
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: L型氨基酸转运载体1 真核表达载体 Neuro-2a细胞 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 25-30,9
• 页数: 7页
• 分类号: R332
• 字数: 4437字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2014.005.006

摘要

目的：构建C57小鼠L型氨基酸转运载体1（ LAT1）的真核表达载体，转染Neuro-2a肿瘤细胞进行表达，探讨LAT1对Neuro-2a细胞增殖及凋亡的影响。方法采用RT-PCR扩增出LAT1全长目的基因，定向克隆pcDNA3.1表达载体，构建pcDNA3.1-LAT1重组表达质粒，通过脂质体法将阳性克隆转染Neuro-2a细胞，经G418筛选获得稳定表达株后，用RT-PCR和western blot 蛋白印迹法检测LAT1的表达情况。通过MTT法检测各组Neuro-2a细胞的增殖情况，并借助流式细胞仪检测LAT1对Neuro-2a细胞增殖和凋亡的影响。结果成功构建小鼠pcDNA3.1-LAT1真核表达载体，酶切和测序证实其序列正确，并成功转染Neuro-2a细胞建立稳定转染细胞系。MTT法显示转染重组质粒pcDNA3.1-LAT1的Neuro-2a细胞增殖速度显著高于对照组（P ＜0.05），且流式细胞术检测转染组对Neuro-2a细胞具有促进增殖抑制凋亡的作用。结论转染 pcDNA3.1-LAT1质粒的Neuro-2a细胞能成功表达LAT1蛋白，且LAT1对Neuro-2a细胞的增殖和凋亡均有显著影响，为进一步研究LAT1的生物学作用奠定了重要基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘田福	山西医科大学实验动物中心	76	395	9.0	16.0
2	樊林花	山西医科大学实验动物中心	21	93	7.0	9.0
3	刘茂林	山西医科大学实验动物中心	25	113	7.0	10.0
4	卫兵艳	山西医科大学实验动物中心	11	15	2.0	3.0