甘蔗黄叶病毒P0基因的克隆与原核表达及抗血清制备

• 作者: 刘向蕊 王洪星 邹游兴
• 来源期刊: 中国糖料
• 关键词: 甘蔗黄叶病毒 沉默抑制子 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-3,9
• 页数: 4页
• 字数: 3473字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13570/j.cnki.scc.2014.02.001

摘要

根据已发表ScYLV-P0基因系列设计特异性引物,应用RT-PCR技术从甘蔗病叶的mRNA扩增得到目的DNA片段.以pET32a(+)为原核表达载体,构建重组表达质粒pET32a-P0.经过双酶切鉴定和DNA测序后,将重组表达质粒转入大肠杆菌BL21 (DE3)pLySs,在30℃培养条件下IPTG诱导表达.通过SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达情况.表达结果显示,在该表达系统中,融合表达蛋白P0是以包涵体形式的蛋白存在;P0融合蛋白大小约45kDa,与P0开放阅读框的理论推算值29.991 kDa加上载体自身蛋白约18 kDa相符,用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白,免疫家兔制备出抗血清,通过酶联法(ID-ELISA)测定本实验制备的ScYLY-P0抗血清工作浓度为1:25000.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪星	海南大学应用科技学院	15	23	3.0	3.0
2	邹游兴	海南大学应用科技学院	4	12	2.0	3.0
3	刘向蕊	海南大学应用科技学院	2	3	1.0	1.0