人FOXO3a基因真核表达载体的构建及其功能验证

• 作者: 冯滢滢 叶棋浓 周丽英 徐小洁 李玲 梁迎春 王涛 郭芸菲 郭靖
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人FOXO3a基因 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 625-627,648
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2479字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.05.005

摘要

目的:构建带myc标签的人FOXO3a基因真核表达载体,并对其功能进行初步检测.方法:采用PCR技术,从乳腺文库中扩增人FOXO3a基因,并将其正确插入pXJ-40-myc载体;将重组质粒与空载体分别转染人乳腺癌细胞系ZR75-1、MCF-7后,通过Western印迹检测其表达情况,并用CCK8法测定细胞生长曲线.结果:双酶切和测序鉴定表明myc-FOXO3a真核表达质粒构建成功,转染乳腺癌ZR75-1、MCF-7细胞后目的基因成功表达;细胞生长曲线结果显示,转染myc-FOXO3a的乳腺癌细胞较空载体细胞生长较慢.结论:构建了带myc标签的人FOXO3a基因真核表达载体,为进一步研究FOXO3a在乳腺癌中的功能奠定了基础.