环形泰勒虫微线体-棒状体基因的原核表达及表达产物的免疫原性分析

• 作者: 何海宁 关贵全 刘志杰 岑双庆 张晓 李安岩 李有全 杨吉飞 陈泽
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 环形泰勒虫 微线体-棒状体蛋白 原核表达 Western-blot
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 599-604
• 页数: 6页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

为了解环形泰勒虫微线体-棒状体蛋白的生物学特性,通过生物信息学分析,选取环形泰勒虫微线体-棒状体蛋白特异性和抗原性最高的一段开放阅读框进行RT-PCR扩增,将所获基因片段连接到原核表达载体pGEX-4T-1中进行表达,将表达产物纯化后免疫家兔制备该蛋白的多克隆抗体.通过SDS-PAGE和Western-blot分析该基因的原核表达情况和表达产物的反应原性.生物信息学分析发现,该蛋白第470～650位氨基酸残基的特异性和抗原性最高.对诱导条件的摸索发现,在37℃、1.0 mmol/L IPTG条件下诱导6h表达量最高,表达产物大小为43 ku.Western-blot结果显示,该蛋白能被环形泰勒虫阳性的牛血清所识别,具有很好的反应原性.本研究制备的多克隆抗体为后期研究微线体-棒状体蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李有全	中国农业科学院兰州兽医研究所	28	27	3.0	5.0
2	关贵全	中国农业科学院兰州兽医研究所	33	77	6.0	8.0
3	刘志杰	中国农业科学院兰州兽医研究所	16	4	1.0	2.0
4	张晓	中国农业科学院兰州兽医研究所	19	107	4.0	10.0
5	陈泽	中国农业科学院兰州兽医研究所	10	27	2.0	5.0
6	杨吉飞	中国农业科学院兰州兽医研究所	10	0	0.0	0.0
7	李安岩	中国农业科学院兰州兽医研究所	5	0	0.0	0.0
8	岑双庆	中国农业科学院兰州兽医研究所	3	0	0.0	0.0
9	何海宁	中国农业科学院兰州兽医研究所	4	0	0.0	0.0