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摘要:
目的:构建O157∶H7 EDL933菌株Ⅲ型分泌系统( T3SS)缺陷突变株ΔescR,感染HeLa细胞后检测其黏附能力。方法通过重叠延伸PCR扩增出中间为卡那霉素抗性基因,两侧为escR基因上下游同源序列的重组线性DNA片段,电击转入含pKD46的EDL933感受态细胞中,escR基因被kan基因替换而缺失。绘制野生株与ΔescR生长曲线,并利用免疫荧光观察两株细菌对HeLa细胞的黏附能力。结果获得缺陷突变株ΔescR,相较于野生株,该突变株在DMEM(10%FBS)培养基中生长速度以及对HeLa细胞的黏附能力明显下降。结论 T3SS结构蛋白escR基因的缺失破坏了EDL933 T3SS的形成,影响了该菌株黏附能力,其构建为后续研究T3SS奠定了基础。
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文献信息
篇名 大肠杆菌O157∶H7Ⅲ型分泌系统的缺陷突变株对HeLa细胞黏附能力的影响
来源期刊 军事医学 学科 医学
关键词 大肠杆菌 O157∶H7 Ⅲ型分泌系统 escR基因 HeLa细胞 λRed同源重组
年,卷(期) 2014,(10) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 795-798
页数 4页 分类号 R378.21
字数 3583字 语种 中文
DOI 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.10.012
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 梁龙 军事医学科学院生物工程研究所 33 293 8.0 16.0
2 廖翔 军事医学科学院生物工程研究所 14 163 7.0 12.0
3 戴红梅 军事医学科学院生物工程研究所 19 88 6.0 8.0
4 宋婷 军事医学科学院生物工程研究所 4 11 2.0 3.0
5 周围 军事医学科学院生物工程研究所 11 28 4.0 4.0
6 王玉瑞 军事医学科学院生物工程研究所 1 1 1.0 1.0
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大肠杆菌
O157∶H7
Ⅲ型分泌系统
escR基因
HeLa细胞
λRed同源重组
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