重组鸡β-防御素12蛋白的原核表达及其生物学特性分析

• 作者: 刘胜旺 张婷婷 徐倩倩 徐杨 李妍妍 韩宗玺 马得莹
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡β-防御素12 重组蛋白 抗菌活性 组织分布
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 49-56
• 页数: 8页
• 分类号: S831
• 字数: 6441字
• 语种: 中文

摘要

为探讨鸡β-防御素12（AvBD12）的生物学特性，试验采用RT-PCR方法从鸡脾脏组织中扩增到鸡AvBD12基因，其cDNA大小为198 bp，编码65个氨基酸。将该基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pProex HTa上，进行原核表达。Tricine-SDS-PAGE电泳表明，重组鸡AvBD12融合蛋白分子质量约为14 ku。对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定，结果显示，纯化后的重组鸡AvBD12融合蛋白对金黄色葡萄球菌和兔波氏杆菌有较高抗菌活性，对猪霍乱沙门氏菌和乳酸菌的抗菌活性较弱。高盐浓度对其抗菌活性有显著影响。该重组蛋白对鸡红细胞无显著溶血活性。荧光定量PCR结果表明，AvBD12基因在所测定的15个鸡组织器官中均有表达。