多色探针荧光PCR熔解曲线法在G6PD基因突变检测中的临床应用评价

• 作者: 严提珍 唐宁 李伍高 王秋华 罗世强 蔡稔 钟青燕 韦朔峰 黄秋英
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 实时荧光PCR 熔解曲线分析 基因突变
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 156-162
• 页数: 7页
• 字数: 5604字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2014.02.007

摘要

目的 对多色探针荧光PCR熔解曲线法用于葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症G6PD基因突变检测进行临床评价.方法 收集402份疑似患者或其家系成员的外周血样本(男256例、女146例),先用酶学方法(G6PD/6PGD定量比值法)进行G6PD缺乏症初筛,经基因DNA提取后,按双盲对照试验,分别应用多色探针荧光PCR熔解曲线法(可检测16种G6PD基因突变)和DNA测序法对各样本进行G6PD基因突变检测,比较两种方法基因突变的符合率.结果 酶学检测发现G6PD/6PGD比值＜1.0的样本有170例,G6PD/6PGD比值≥1.0的样本232例.应用DNA测序法检出182例野生型样本,151例半合子突变型样本,5例女性纯合突变型样本,54例女性杂合突变型样本和10例女性复合杂合突变型样本;使用多色探针荧光PCR熔解曲线法检出185例野生型样本,148例半合子突变型样本,5例女性纯合突变型样本,55例女性杂合突变型样本和9例女性复合杂合突变型样本.多色探针荧光PCR熔解曲线法检测G6PD基因突变的特异性为100％(182/182),灵敏度为98.6％(217/220),阳性预测值为99.5％(216/217),阴性预测值为98.4％(182/185),约登指数为0.986,总符合率为99.0％(398/402).多色探针荧光PCR熔解曲线法共检出21种基因型,DNA测序法检出24种基因型.有4例样本与DNA测序法的基因型检测结果不相符,主要原因为这些样本的G6PD基因突变不在多色探针荧光PCR熔解曲线法所设计的检测范围内.结论 荧光PCR熔解曲线用于G6PD基因突变的检测,具有简便、快速、灵敏度高、特异性强等优点,可用于G6PD缺乏症的临床辅助诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐宁		24	61	4.0	7.0
2	严提珍		9	28	1.0	5.0
3	黄秋英	厦门大学分子诊断教育部工程研究中心	5	41	2.0	5.0
4	罗世强		10	36	3.0	6.0
5	李伍高		5	34	2.0	5.0
6	韦朔峰		3	27	1.0	3.0
7	钟青燕		3	26	1.0	3.0
8	王秋华		2	26	1.0	2.0