变性再复性方法提取高纯度Cav1.2片段GST-CT1及其生物活性的鉴定

• 作者: 孙威 孙宇 封瑞 胡慧媛 郝丽英
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 包涵体 变性再复性 钙离子通道
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 777-780
• 页数: 4页
• 分类号: R96
• 字数: 3179字
• 语种: 中文

摘要

目的 探寻诱导谷胱甘肽转移酶(GST)与Cavl.2钙通道片段CT1重组的易形成包涵体的大分子融合蛋白的提取与纯化的方法.方法 在E.coli BL21中转化入pGEX-6p-3/CT1重组质粒并诱导表达,采用GST包涵体变性复性试剂盒和非离子去污剂B-PER分离纯化GST-CT1融合蛋白,用Pull down assay方法鉴定GST-CT1融合蛋白及其生物活性.结果 应用GST包涵体变性复性试剂盒和非离子去污剂B-PER能够分离得到高纯度的易形成包涵体的GST-CT1融合蛋白,且分离纯化的GST-CT1融合蛋白具有与钙调蛋白结合的生物活性.结论 操作简易的GST包涵体变性复性法能够针对易形成包涵体的GST-CT1融合蛋白进行分离和纯化,且得到的蛋白具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝丽英	中国医科大学药学院药物毒理教研室	56	146	6.0	9.0
2	孙威	中国医科大学药学院药物毒理教研室	85	361	10.0	14.0
3	封瑞	中国医科大学药学院药物毒理教研室	31	128	7.0	10.0
4	孙宇	中国医科大学药学院药物毒理教研室	6	11	2.0	3.0
5	胡慧媛	中国医科大学药学院药物毒理教研室	32	127	6.0	9.0