GST-NAP融合蛋白可溶性表达及柱上切割GST标签

• 作者: 傅国 刘鑫 康巧珍 汲振余 黄夏冰
• 来源期刊: 郑州大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: GST-NAP 重组质粒 蛋白表达 GST标签
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 页码范围: 94-98
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3374字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6841.2015.04.018

摘要

利用基因工程的方法,以实验室保存的pMAL-C2X-NAP质粒为模板,PCR扩增NAP基因,构建重组质粒pGEX-NAP.重组质粒通过酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),再经IPTG低温诱导获得可溶性GST-NAP融合蛋白,最后利用谷胱甘肽琼脂糖凝胶树脂进行纯化,Prescission蛋白酶进行柱上切割去除GST标签.结果表明,pGEX-NAP重组质粒构建正确,在大肠杆菌中经IPTG低温诱导表达,可获得大量可溶性GST-NAP融合蛋白. Prescission蛋白酶柱上切割去除GST标签后,经Western Blot 验证NAP蛋白能被兔抗NAP多克隆抗体特异识别.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汲振余		13	33	3.0	5.0
2	康巧珍	郑州大学生命科学学院分子免疫学实验室	32	117	7.0	9.0
3	刘鑫	郑州大学生命科学学院分子免疫学实验室	39	61	5.0	6.0
4	黄夏冰	郑州大学生命科学学院分子免疫学实验室	4	17	3.0	4.0
5	傅国	郑州大学生命科学学院分子免疫学实验室	1	7	1.0	1.0