乳腺癌 T7噬菌体展示文库的构建

• 作者: 徐煌 肖燕萍 韩冬
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示 cDNA 文库 乳腺癌
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1823-1825
• 页数: 3页
• 分类号: R372
• 字数: 2436字
• 语种: 中文

摘要

目的：本研究拟构建人乳腺癌 T7噬菌体展示文库，为进一步筛选特异性高的乳腺癌分子标志物原奠定基础。方法确诊乳腺癌患者手术标本20例，Trizol 法提取总 RNA，逆转录合成双链 cDNA 后，与 T7 Select 10－3载体连接，体外包装并扩增得到人乳腺癌 T7噬菌体展示 cDNA 文库。结果构建了乳腺癌 T7噬菌体展示 cDNA 文库，文库滴度2．1×107 pfu／ml。随机从文库抽取50个克隆 PCR 扩增插入片段，电泳结果显示乳腺癌文库插入率98％（49／50）。结论成功构建了乳腺癌 T7噬菌体展示 cDNA 文库，为筛选和鉴定乳腺癌相关抗原奠定基础。