绿色荧光蛋白探针标记的 MIM-I-BAR 基因构建和表达

• 作者: 刘袁 常维维 方琳静 曹萌 许阳 顾宁
• 来源期刊: 东南大学学报（英文版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 转移消失蛋白 inverse Bin-amphiphysin-Rvs 绿色荧光蛋白 基重组因 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 353-357
• 页数: 5页
• 分类号: Q816
• 字数: 633字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-7985.2015.03.009

摘要

为制备可视化的转移消失蛋白（MIM）的 I-BAR 结构域重组体，克隆了顺联绿色荧光蛋白（GFP）探针编码序列的 MIM-I-BAR 基因．在6xHis 标签原核表达质粒上成功构建了 DNA 序列．同时，实现了未标记荧光探针基因的 MIM-I-BAR 质粒的构建以作实验对照．成功转染至 BL21（DE3）大肠杆菌细胞后，GFP 偶联的 MIM-I-BAR （MIM-I-BAR-GFP）蛋白表现出很强的可视荧光，该表达产物可方便的通过目测、荧光显微镜、免疫印迹和紫外可见分光光度计等多种手段进行检测．此外，在考察不同条件下的蛋白表达效率过程中发现，带有 GFP 探针的 MIM-I-BAR 重组蛋白在温度为10℃时产率最高，而并非37℃．这一特征与非荧光标记的 MIM-I-BAR 明显不同．研究证实该最佳表达温度条件适用于重组蛋白产品中量制备．所开发的带有荧光探针的 MIM-I-BAR 蛋白产品及其制备工艺在科学研究、生物医学应用以及药物开发过程中均有较高的应用价值．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾宁	东南大学生物科学与医学工程学院	182	1683	20.0	32.0
2	刘袁	东南大学吴健雄学院	5	16	2.0	4.0
3	许阳	东南大学吴健雄学院	5	13	2.0	3.0
4	曹萌	东南大学生物科学与医学工程学院	12	41	4.0	6.0
5	常维维	东南大学生物科学与医学工程学院	1	0	0.0	0.0
6	方琳静	东南大学吴健雄学院	1	0	0.0	0.0