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摘要:
为获取具有生物学活性的弓形虫MAPK1蛋白,根据GenBank中编码MAPK1的已知序列设计并合成1对引物,用NCoⅠ和HindⅢ双酶切后,连接到同样双酶切的原核表达载体PET?28a上,构建重组表达质粒PET?28a?MAPK1并转化至E.coli BL21感受态,用IPTG诱导表达,表达产物用Ni2+螯合柱亲和纯化,纯化后进行SDS-PAGE和 Western blotting分析。结果表明:表达质粒在E.coli BL21中得到表达,克隆的MAPK1基因与GenBank中收录的基因序列同源性为99?9%。对重组质粒进行酶切鉴定,获得1599 bp大小的目的基因片段,与预期结果相符,成功地构建了重组质粒PET?28a?MAPK1。Ni2+螯合柱纯化后蛋白浓度为0?26 mg/mL,可用作免疫原,经SDS-PAGE电泳显示PET?28a?MAPK1融合蛋白的分子量约为58 ku。 Western blotting显示融合蛋白具有良好的抗原性。
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文献信息
篇名 弓形虫MAPK1基因的克隆与原核表达?
来源期刊 吉林农业大学学报 学科 农学
关键词 弓形虫 MAPK1基因 克隆 原核表达
年,卷(期) 2015,(2) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 221-225,236
页数 6页 分类号 S852.72
字数 3481字 语种 中文
DOI 10.13327/j.jjlau.2015.2351
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 赵权 吉林农业大学动物科学技术学院 125 322 9.0 12.0
2 刘全 军事医学科学院军事兽医研究所 27 110 6.0 8.0
3 宫上舒 吉林农业大学动物科学技术学院 1 2 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
弓形虫
MAPK1基因
克隆
原核表达
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
吉林农业大学学报
双月刊
1000-5684
22-1100/S
大16开
吉林省长春市新城大街2888号
1979
chi
出版文献量(篇)
3333
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5
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33048
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