HPV58型E2蛋白表达纯化与多克隆抗体制备

• 作者: 唐海平 姜文婷 徐万祥 程一航 詹建民 谢毅 连文博 顾少华
• 来源期刊: 生殖与避孕
• 学科: 医学
• 关键词: HPV58型E2蛋白 蛋白表达 包涵体纯化 抗体制备
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 674-679
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.7669/j.issn.0253-357X.2015.10.0674

摘要

目的:表达纯化重组人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)58型E2蛋白,制备多克隆抗体.方法:构建重组质粒pET-28b-E2,转化至BL21(DE3)pLysS中诱导表达,包涵体洗涤后经镍柱亲和层析分离得到纯化目的蛋白.用纯化的重组E2蛋白免疫新西兰白兔,制备兔抗HPV58型E2蛋白多克隆抗体,ELISA分析多克隆抗体的效价,免疫印迹检测抗体的特异性.结果:表达纯化了重组HPV58型E2蛋白,制备了高滴度和高特异性的多克隆抗体.结论:制备的多克隆抗体可用于对HPV58型E2蛋白进行精细B细胞线性表位鉴定.