单增李斯特菌内化素A分段表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 乔薪瑗 刘敏 唐丽杰 姜艳平 崔文 李一经 谢小冬
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 单增李斯特菌 内化素A(InlA) 分段表达 多克隆抗体 入侵细胞 功能分析
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 137-139,237
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65|S852.4+3
• 语种: 中文

摘要

为了研究单增李斯特茵(Listeria monocytogenes)InlA蛋白入侵细胞时各段相关功能,试验采用PCR技术扩增得到L.monocytogenes 08-5923株InlA基因片段,测序后利用GenBank对InlA氨基酸序列进行分段,分为2个基因片段,即InlA1(1～1 488 bp)和InlA2(1 315～2 403 bp),将其分别克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,并转化至宿主茵中诱导表达,表达的重组蛋白经Western-blot和间接ELISA法鉴定,用纯化的重组蛋白分别免疫家兔,并用ELISA法检测家兔多克隆抗体的特异性.结果表明:表达的2种重组蛋白分子质量分别约为79 ku和64 ku,以其制备的多克隆抗体均可与单增李斯特茵InlA天然蛋白发生反应;2种重组蛋白均能有效诱导抗体反应,其中InlA2(new flag)诱导产生的抗体效价较高,与单增李斯特茵InlA天然蛋白结合能力较强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李一经		219	1679	20.0	27.0
2	唐丽杰		90	615	13.0	20.0
3	刘敏		57	476	12.0	20.0
4	乔薪瑗		54	297	9.0	14.0
5	姜艳平		51	283	10.0	15.0
6	崔文		49	148	7.0	9.0
7	谢小冬		1	0	0.0	0.0