线粒体自噬受体Nix蛋白的原核表达及其纯化

• 作者: 吴湘涛 张星亮 林千文 熊英环
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: 线粒体自噬受体Nix 载体构建 亲和层析 凝胶过滤层析
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 394-398,402
• 页数: 6页
• 分类号: R651
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2015.04.007

摘要

目的 获得可用于蛋白晶体筛选的高纯度及构象均一的Nix蛋白.方法 将Nix截断基因构建到原核载体并转化大肠杆菌.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后通过GST柱亲和纯化目标蛋白.TEV酶切除GST标签后采用凝胶过滤层析进一步纯化.结果 Nix截断基因成功构建到pGEX-4T-2并诱导表达了目标蛋白.通过GST亲和层析得到了可溶性的携带GST标签的Nix(2～135)蛋白.切除GST标签的Nix(2～135)通过凝胶过滤层析得到了构象均一的单体蛋白.结论 采用原核表达、亲和层析和凝胶过滤层析可获得纯度高且构象均一的单体Nix蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张星亮	广东医学院附属医院儿科	8	43	2.0	6.0
2	熊英环	广东医学院附属医院病理科	4	9	1.0	3.0
3	林千文	广东医学院附属医院儿科	2	4	1.0	2.0
4	吴湘涛	广东医学院附属医院儿科	2	4	1.0	2.0