信号调节蛋白-α基因真核表达质粒的构建及其在A549细胞中的表达

• 作者: 井申荣 曾韦锟 杨臣臣 毕艳红 黄芬
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 信号调节蛋白-α A549细胞 基因表达 肺癌
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 493-496
• 分类号: Q257|Q782
• 语种: 中文

摘要

目的 构建信号调节蛋白-α(signal regulatory protein-α,SIRP-α)基因真核表达质粒,并于A549细胞中进行表达.方法 提取HepG2细胞总RNA,RT-PCR扩增SIRP-α基因片段,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)-EGFP中,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-SIRP-α/EGFP.将重组表达质粒转染A549细胞,转染24 h后,荧光显微镜下观察转染情况;转染48 h后,RT-PCR检测SIRP-α基因的转录水平;转染72 h后,Western blot法检测SIRP-α蛋白的表达.结果 经双酶切和测序鉴定真核表达质粒pcDNA3.1 (+)-SIRP-α/EGFP构建正确;转染pcDNA3.1(+)-SIRP-α/EGFP的A549细胞于荧光显微镜下可见绿色荧光;RT-PCR检测结果可见243 bp目的条带,Western blot检测显示SIRP-α存在.结论 成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-SIRP-α/EGFP,并于A549细胞中有效表达,为进一步研究SIRP-α与肺癌的相关性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	井申荣	昆明理工大学医学院	89	229	8.0	12.0
2	黄芬	昆明理工大学医学院	45	49	4.0	5.0
3	曾韦锟	昆明理工大学医学院	34	49	4.0	5.0
4	毕艳红	昆明理工大学医学院	12	2	1.0	1.0
5	杨臣臣	昆明理工大学医学院	11	2	1.0	1.0