LSPA1早期基因gp22细菌双杂交诱饵载体与筛选文库的建立

• 作者: 井申荣 冯梦蝶 宋武战 杨洪文 毛普加 洪愉 许泽仰 赵继华 黄芬
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 细菌双杂交 诱饵载体 基因组文库 早期基因 甲型副伤寒沙门氏菌
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 214-219
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.033

摘要

构建细菌双杂交系统中的诱饵载体pKT25-gp22和甲型副伤寒沙门氏菌基因文库以便后续的筛选实验.PCR扩增获得gp22基因,插入pKT25构成诱饵质粒pKT25-gp22.提取甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA,经Sau3A Ⅰ部分酶切后连接到pUT18C质粒的BamH Ⅰ位点,获得基因组DNA表达文库.用化转的方法将诱饵质粒与pUT18C共转入BTH101,检测诱饵质粒自激活作用,并检测诱饵蛋白对宿主菌的毒性.将文库质粒电转至JM109感受态,PCR鉴定文库的多样性.诱饵载体pKT25-gp22无自激活报告基因的能力且对细菌的生长无毒性.所构建的副甲基因组文库覆盖基因组达8倍,满足文库筛选需要.成功构建细菌双杂交系统中诱饵载体pKT25-gp22,筛选文库质量良好,可应用于细菌双杂交实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	井申荣	昆明理工大学医学院	89	229	8.0	12.0
2	宋武战	成都军区昆明总医院核医学科	32	122	7.0	10.0
3	洪愉	成都军区昆明总医院核医学科	21	58	4.0	6.0
4	赵继华	成都军区昆明总医院核医学科	7	28	3.0	5.0
5	毛普加	昆明理工大学医学院	7	23	3.0	4.0
6	冯梦蝶	昆明理工大学医学院	6	14	3.0	3.0
7	许泽仰	昆明理工大学医学院	5	14	3.0	3.0
8	黄芬	昆明理工大学医学院	45	49	4.0	5.0
9	杨洪文	成都军区昆明总医院核医学科	12	61	4.0	7.0