单增李斯特菌毒力因子多重荧光PCR法建立与应用

• 作者: 张奕南 蔡强 赵冉 郑江 黄新新
• 来源期刊: 食品安全质量检测学报
• 关键词: 多重荧光PCR 单增李斯特菌 hlyA inA actA
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 本期专题:食源性致病微生物
• 页码范围: 3453-3459
• 页数: 7页
• 字数: 4776字
• 语种: 中文

摘要

目的：建立同时检测单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)及其3种毒力因子的多重荧光PCR快速检测方法,并应用于日常食品的检测。方法根据单增李斯特菌溶血素基因 hlyA、内化素基因 inlA 和表面蛋白actA 基因的保守序列,分别设计合成特异性引物和探针,优化多重荧光 PCR 反应体系。对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果该法特异性强、敏感性高,对单增李斯特菌纯培养物的最低检出限410 cfu/mL；重复性好,变异系数均小于2%。对84份食品检测结果与传统国标法相符,共检出单增李斯特菌4份,检出率为4.76%。多重荧光PCR检测方法耗时1 h,比传统方法节约2~5 d。4株单增李斯特菌分离株中2株同时含有inlA、actA、hlyA 3种毒力基因,另2株为毒力基因actA缺失株,提示目前流行株并非同一来源。结论本研究建立的多重实时荧光 PCR方法能同时对单增李斯特菌及其3种毒力因子进行快速检测,且灵敏度高、特异性好,为食源性疾病的病原学检测提供了快速可靠的方法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵冉		15	141	7.0	11.0
2	蔡强		68	373	12.0	16.0
3	黄新新		6	4	2.0	2.0
4	郑江		5	13	2.0	3.0