结核分枝杆菌16kD-CFP10-19kD融合蛋白的构建表达及纯化

• 作者: 冯书阳 常琳 张新慧 赵爽 马晓蕾
• 来源期刊: 中国处方药
• 关键词: 结核分枝杆菌 16kD蛋白 CFP10蛋白 19kD蛋白 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 19-21
• 页数: 3页
• 字数: 2723字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建结核分枝杆菌(MTB)16kD-CFP10-19kD融合蛋白表达载体,在大肠杆菌中对蛋白进行表达并经过纯化获得16kD-CFP10-19kD融合蛋白.方法 利用聚合酶链式反应(PCR)方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板扩增16kD、CFP10及19kD基因,经过限制性内切酶处理并依次与pET28a载体连接,构建pET28a-16kD-CFP10-19kD重组质粒,转化至大肠杆菌表达株BL21中,在IPTG及低温诱导下获得目标蛋白,镍柱层析获得纯化蛋白.结果 经过酶切及测序鉴定验证pET28a-16kD-CFP10-19kD重组质粒构建正确,原核表达获得可溶性目标蛋白并对其初步纯化.结论 成功构建表达并纯化获得16kD-CFP10-19kD融合蛋白,为开发新的结核病特异性诊断抗原研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵爽	沈阳市第四人民医院儿科	6	3	1.0	1.0
2	马晓蕾		2	0	0.0	0.0
3	张新慧		2	0	0.0	0.0
4	常琳		2	0	0.0	0.0
5	冯书阳		1	0	0.0	0.0