玉米内州萎蔫病菌LAMP快速检测方法的建立

• 作者: 单长林 周圆 张建成 李孝军 李雪松 杨赛军 王健
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米内州萎蔫病菌 LAMP 检测
• 年，卷（期）: 2015,（22）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 17-20,22
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3935字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立玉米内州萎蔫病菌的快速恒温扩增检测技术.[方法]利用GenBank公布的玉米内州萎蔫病菌(Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis,Cmn)16S-23S序列设计LAMP(loop-mediated isothermal amplification)引物,建立玉米内州萎蔫病菌LAMP检测体系,并对反应条件进行了优化.[结果] LAMP在内引物、环化引物和外引物比为6∶4∶1(30 pmol∶20 pmol∶5 pmol)的25山体系下64℃反应30 min为最佳反应条件,且LAMP引物能从供试的7种菌株中特异性扩增出Cmn梯度性条带.以玉米内州萎蔫病菌基因组和菌悬液梯度稀释液为模板检测LAMP体系的灵敏度,结果显示,LAMP检测体系针对基因组和菌悬液的灵敏度分别达到了50fg和3.6CFU,比普通PCR灵敏度高100倍.[结果]LAMP检测体系简单、快速、灵敏度高、特异性好,在玉米内州萎蔫病菌检测方面潜力巨大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李孝军		30	92	5.0	8.0
2	杨赛军		25	56	4.0	6.0
3	单长林		7	10	2.0	2.0
4	周圆		10	18	3.0	3.0
5	张建成		4	71	1.0	4.0
6	李雪松		3	7	2.0	2.0
7	王健		2	8	1.0	2.0