杜仲EuCHIT1基因表达载体构建及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 丁延庆 冉昕 董旋 赵德刚
• 来源期刊: 山地农业生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 杜仲 几丁质酶基因( EuCHIT1) 原核表达 可溶性蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: Q948
• 字数: 2769字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2016.05.002

摘要

构建了T7启动子驱动杜仲几丁质酶基因EuCHIT1的原核表达载体pET-EuCHIT1和pMCSG-EuCHIT1,其表达产物分别含6个组氨酸(6His)标签和6个组氨酸连接的麦芽糖结合蛋白(his6-tag–maltose-binding pro-tein, MBP)标签,分别将重组载体遗传转化大肠杆菌细胞BL21(DE3),在37℃、150 rpm条件下培养至菌液OD值为0.4~0.8后,转到16℃、150 rpm条件下以1 mM IPTG诱导培养12 h,表达产物经SDS-PAGE分析,pET-Eu-CHIT1/BL21( DE3)表达以包涵体形式存在36.03 kD融合蛋白,pMCSG-EuCHIT1/ BL21( DE3)成功表达可溶形式存在的77.21 kD融合蛋白。故可以使用pMCSG-EuCHIT1/ BL21( DE3)获得可溶的融合蛋白,为之后的EuCH-IT1的多克隆抗体的制备和及功能研究奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵德刚	贵州大学农业生物工程研究院	152	1295	18.0	28.0