牛eIF5基因原核表达与蛋白纯化

• 作者: 臧艳丽 骆超超 高学军 魏诚杰
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛 eIF5 克隆 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 页码范围: 68-73
• 页数: 6页
• 分类号: S823|Q785
• 字数: 4895字
• 语种: 中文

摘要

研究应用PCR方法扩增牛eIF5基因编码序列，通过Eco R Ⅰ和Sal Ⅰ酶切位点将其定向插入pGEX-4T-1载体，构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-eIF5，并转化大肠埃希菌BL21。酶切和测序鉴定正确后，用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）大量诱导表达，利用GST-Sepharose 4B亲和珠纯化，SDS-PAGE和Western Blot鉴定。结果表明，原核表达载体pGEX-4T-1-eIF5构建成功，Western Blot证实融合蛋白大量表达，纯化后获得GST-eIF5融合蛋白，为深入研究牛eIF5蛋白功能奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高学军	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	183	1315	18.0	27.0
2	骆超超	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	12	41	4.0	5.0
3	臧艳丽	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	3	10	2.0	3.0
4	魏诚杰	东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室	1	2	1.0	1.0