重组人胸腺肽α1在大肠杆菌中的表达纯化与鉴定

• 作者: 周卫东 尹凤红 肖清江 陈清西
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人胸腺肽α1(rhTα1) 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 192-197
• 页数: 6页
• 分类号: Q356.1
• 字数: 5325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6043/j.issn.0438-0479.2016.02.008

摘要

采用大肠杆菌作为宿主表达重组人胸腺肽α1(rhTα1)融合蛋白,纯化获得rhTα1并对其鉴定.于300L发酵罐进行中试发酵表达rhTα1融合蛋白;经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导,离心发酵液收集菌体,菌体经破碎、离心、亲和层析捕获,获得融合蛋白;每升发酵液可获得约170 mg硫氧环蛋白-胸腺肽α1融合蛋白.融合蛋白经肠激酶酶切后,再经亲和层析、反相层析、体积排阻层析等纯化步骤,获得高纯度rhTα1;通过本纯化工艺获得的rhTα1原液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效液相色谱-排阻法(HPLC-SEC)的检测纯度均大于99%;采用玫瑰花环形成率测定rhTα1活性与市售化学合成标准品一致;质谱分析分子质量为3066.59 u,与去乙酰化的rhTα1理论分子质量(3066 u)一致;N端测序结果与理论值一致.综上结果,说明本工艺可实现工业化规模生产.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈清西	厦门大学生命科学学院	114	2033	24.0	40.0
2	肖清江		2	2	1.0	1.0
3	周卫东		2	2	1.0	1.0
4	尹凤红	厦门大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0