LV-calb2和LV-siRNA-calb2慢病毒载体的构建及其在睾丸间质细胞的表达

• 作者: 代晓南 刘嘉茵 崔毓桂 张蓓 徐文丹 朱倩 高莉 高超
• 来源期刊: 国际生殖健康计划生育杂志
• 关键词: 钙结合蛋白,维生素D依赖性 慢病毒属 睾丸 莱迪希细胞 雄激素类
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 96-100
• 页数: 5页
• 字数: 4362字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建钙视网膜蛋白（CALB2）基因超表达及小干扰RNA（siRNA）慢病毒载体，观察CALB2对睾丸间质细胞雄激素合成的调节作用。方法：合成超表达及干涉的质粒，转入制备好的细菌感受态细胞，聚合酶链反应（PCR）鉴定阳性重组子后测序验证，确认构建成功的超表达及干涉慢病毒载体。用上述慢病毒载体分别感染MLTC-1及R2C间质细胞，观察感染效率，而后用放射免疫法检测睾酮和孕酮的合成。结果：PCR和基因测序证实LV-calb2和LV-siRNA-calb2慢病毒载体构建成功，并可高效感染MLTC-1及R2C细胞。超表达CALB2后，MLTC-1细胞睾酮生成显著增加（P＜0.001）；干涉CALB2表达后，R2C间质细胞孕酮生成显著减少（P＜0.05）。结论：成功构建了calb2基因超表达及干涉慢病毒载体，并可体外转染睾丸间质细胞系。初步结果表明，CALB2可促进间质细胞类固醇激素生成。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘嘉茵	南京医科大学第一附属医院生殖医学科	241	1685	19.0	30.0
2	崔毓桂	南京医科大学第一附属医院生殖医学科	167	1067	16.0	22.0
3	高莉	南京医科大学第一附属医院生殖医学科	16	60	4.0	7.0
4	朱倩	南京医科大学第一附属医院生殖医学科	7	19	2.0	4.0
5	代晓南	南京医科大学第一附属医院生殖医学科	7	36	3.0	6.0
6	徐文丹	南京医科大学第一附属医院生殖医学科	6	21	2.0	4.0
7	张蓓	南京医科大学第一附属医院生殖医学科	6	9	2.0	2.0
8	高超	南京医科大学第一附属医院生殖医学科	7	35	3.0	5.0