应用Gibson Assembly法快速构建人组蛋白甲基化转移酶启动子荧光素酶报告载体

• 作者: 单玉喜 朱进 阳东荣
• 来源期刊: 临床与病理杂志
• 关键词: Gibson Assembly 报告载体 人组蛋白甲基转移酶 启动子活性
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 1971-1974
• 页数: 4页
• 字数: 2729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3978/j.issn.2095-6959.2016.12.015

摘要

目的：快速构建人组蛋白甲基转移酶(enhancer of zeste homolog 2，EZH2)启动子荧光素酶报告载体并验证其活性。方法：因EZH2启动子富含GC，故应用Gibson Assembly方法设计分两段扩增，然后将片段一步法连入pGL3-Basic质粒，构建荧光素酶报告载体，进行酶切鉴定。与pRL-TK内参照质粒共转染C4-2细胞，双荧光素酶分析法检测启动子的活性。结果：经酶切鉴定证实成功构建了EZH2启动子报告载体，双荧光索酶报告基因检测结果显示构建的报告载体具有启动子活性。结论：快速成功构建了具有启动子活性的EZH2启动子荧光素酶报告载体，为进一步研究前列腺癌中EZH2表达调控机制提供必要的实验材料。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单玉喜	苏州大学附属第二医院泌尿外科	222	1161	15.0	23.0
2	阳东荣	苏州大学附属第二医院泌尿外科	124	610	12.0	17.0
3	朱进	苏州大学附属第二医院泌尿外科	29	91	5.0	8.0