hsa-microRNA-96-5p down慢病毒表达载体的构建与鉴定

• 作者: 张伟忠 张玉惠 梁金荣 竺王玉 董金良
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: hsa-miR-96-5p慢病毒载体肺癌
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 108-111
• 页数: 4页
• 分类号: R972
• 字数: 2721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2016.06.028

摘要

目的 构建hsa-microRNA-96-5p down慢病毒表达载体并对其进行鉴定.方法 根据hsa-miR-9-5p基因序列设计合成hsa-miR-96-5p-inhibition-a和hsa-miR-96-5p-inhibition-b,将合成后成对的引物干粉溶解于退火缓冲液中引物退火.将慢病毒GV280载体酶切产物通过T4DNA连接酶将双酶切线性化的载体和退火双链DNA连接.经菌落筛选,菌落PCR及测序鉴定,荧光法及药筛法测定病毒效价.结果 菌落PCR和测序验证成功构建了hsa-miR-96-5p down慢病毒载体,经荧光法及药筛法测定病毒效价为3×108TU/ml.结论 成功构建了hsa-miR-96-5p down慢病毒表达载体,为后续深入研究miR-9-5p在肺癌细胞中的生物学行为及机制提供了前期实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	竺王玉	浙江省舟山医院细胞分子生物学实验室	22	103	5.0	10.0
2	梁金荣	浙江省舟山医院普外科	59	234	9.0	12.0
3	董金良	浙江省舟山医院普外科	13	31	3.0	5.0
4	张伟忠	浙江省舟山医院普外科	16	79	5.0	8.0
5	张玉惠	浙江省舟山医院普外科	6	26	2.0	5.0